Agilent xCELLigence RTCA DPlus Instrument多功能实时无标记细胞分析仪

1、RTCA DPlus系统

系统组成

xCELLigence RTCA DPlus多功能实时无标记细胞分析仪可以实现对各种贴壁细胞的检测，主要包括细胞浸润及细胞迁移，细胞增殖检测。细胞的生长，增殖，检测，细胞粘附及生长检测，在受体介导的信号通路检测过程中，RTCA DP系统的动态监测保证了细胞的瞬时响应及长时间效应的获取。RTCA实时无标记细胞分析仪的检测灵敏性和预测性，具有实时数据采集特性，检测周期的短期及长期检测优势。

技术原理

实时无标记动态分析技术（RTCA，Real Time Cell Analysis）是安捷伦生物（原艾森生物）的核心技术。该技术采用特殊工艺，将微电极列正整合在细胞培养板的每个细胞生长孔底部，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。

技术优势

RTCA实时无标记动态检测细胞活性和毒性，获取细胞活性动力学图谱，有助于确定其他检测方法（如细胞死亡、细胞凋亡或其他细胞反应过程中）的检测时间点。RTCA技术检测的实时性提供化合物起效的精确信息。基于阻抗的实时无标记分析系统，具有下列优势：

• CV更低，检测灵敏度更高
• 持续动态监测细胞活性，识别细胞毒性产生的起始时刻，指示zui大效应发生的时间
• 在细胞凋亡及细胞周期等检测中，帮助确定检测时间
• 在实验初期，既可识别细胞接种数目是否合适，zui大限度地减少数据分析过程中，细胞接种及培养板边缘孔效应的影响
• 一种无需标记、动态监测、整个检测NK细胞介导的、细胞杀伤的方法

2、RTCA DPlus包括两个组成单元

RTCA DPlus信号检测和数据分析单元，以及RTCA DPlus系统操作和数据处理单元。RTCA DPlus信号检测和数据分析单元配套有3个E-Plate 16检测模块，可根据不同使用者的需要进行独立操作。匠心的设计，使得RTCA DPlus信号检测和数据分析单元可直接放入CO₂孵育箱中，保证了优化的细胞培养条件。

检测优势

• 无需标记，对细胞无损伤，在生理状态下进行检测，结果准确度高
• 自动、连续监测，同时检测短期（数分钟）和长期（数周）细胞效应，获取全过程动态信息
• 交叉式电极设计，确保高精确性和高重复性，提供更大的动态检测范围
• 完整细胞效应图谱，提供大量、重要的动态反应信息，具有重要指导意义
• 活细胞质量控制，真正实现自身对照参考

仪器特点

• 持凑型设计，体积小巧，节省空间
• 高灵活性3个独立E-Plate 16模块，可同时满足不同研究者的应用需求
• 读取整个E-Plate 16检测最多只需要4秒，捕获细胞响应信号的准确度高
• 支持从细胞迁移、浸润到细胞毒作用等多种检测应用，功能更灵活
• 1.2版本软件，添加网络功能，可对IC50、EC50等数据进行自动计算
• 设备安装简单，即插即用，易维护

1、RTCA DPlus分析仪

尺        寸：24.0cm×26.0cm×22.5cm（W×D×H）（Cradle打开）

重        量：4.5kg

测试信号：测试频率10，25，50kHz；22mV rms±20%；直流偏置＜5mV

测量精度：±（1.5%急+1Ω）

测试重复性：99.2%

动态范围：10Ω-5Ω

开关电阻：2Ω-5kΩ

通        讯：USB转RS232（波特率：57600bps）

环境温度：＋15℃~+40℃

相对温度：≤98%，无冷凝

2、E-plate 16

尺        寸：4.0cm×8.7cm×1.96cm（W×D×H）（含盖子）

孔  间  距：孔中心距为9mm，符合ANSI/SBS 4-2004标准

孔  容  积：270μL ± 10μL

孔底直径：5.0mm ± 0.075mm

信号接口：与RTCA DP Analyzer压针接触

传感器阻抗：PBS溶液，10kHz测试条件下17Ω ± 5Ω

材       料：生物相容表面紫外灭菌

环境温度：＋15℃~+40℃

相对湿度：≤98%，无冷凝

3、CIM-Plate 16（上室）

尺       寸：3.99cm×8.69cm×0.97cm（W×D×H）（含膜）

孔  间  距：孔中心距为9mm，符合ANSI/SBS 4-2004标准

孔  容  积：180μL ± 5μL

孔底直径：5.0mm ± 0.075mm

信号接口：与RTCA DP Analyzer压针接触

结       构：与CIM-Plate16下室装配使用

传感器阻抗：PBS溶液，10kHz测试条件下17Ω ± 5Ω

材       料：生物相容表面紫外灭菌

环境温度：＋15℃~+40℃

相对湿度：≤98%，无冷凝

4、CIM-Plate 16（下室）

尺       寸：3.99cm×8.69cm×1.94cm（W×D×H）（含膜）

孔  间  距：孔中心距为9mm，符合ANSI/SBS 4-2004标准

孔  容  积：162μL ± 3μL

孔底直径（O型圈）：6.0mm ± 0.075mm

结       构：与CIM-Plate16上室装配使用

材       料：生物相容表面伽马射线灭菌

环境温度：＋15℃~+40℃

相对湿度：≤98%，无冷凝

1、细胞治疗杀伤效果评估

不同的CAR-T细胞体现了不同的杀伤特征，其中一些具有短时程杀伤效果，但不具备长时程杀伤能力；而同时具备短时程及长时程杀伤效果的CAR-T细胞是研究需要的。

RTCA技术实时评价不同靶向的CAR-T杀伤能力，得到完整杀伤动力学曲线及效靶比，帮助研究者更高效率进行CAR-T药物研发。同时，RTCA技术可以与影像结果相互佐证，丰富研究手段。

2、环境毒理评价

各个雾霾受试浓度均体现对BEAS-2B的细胞毒性，IC50 0.186mg/mL。

RTCA技术实时无标记检测空气污染物——雾霾颗粒对人源肺细胞毒作用，并计算任意时间点IC50值。

3、材料毒理评价

RTCA检测纳米氧化硅材料对CHO细胞毒作用并计算IC50值。