液相色谱系统筛查精细化学品中的杂质

前言为了确保产品质量、性能以及消费者安全，分析原料、中间体以及最终用途广泛的成品中的杂质分析至关重要。使用高效液相色谱（HPLC）成功进行杂质分析的基本条件包括整个分离过程中的梯度洗脱和多波长监测，并可从其他检测器中获益，如蒸发光散射仪（ELSD）和质谱仪（MS）。由于杂质测定是首要目标，我们需要确保流动相、样品瓶及 HPLC 组件中无杂质，杂质的存在可能造成分析结果混乱。稀释空白和可能由于额外样品制备，如过滤而存在污染源的空白应小心制备。分析顺序可能包括生产原料、溶剂或稀释空白的运行。通过稀释主要成分到杂质检测必需的水平而制定的限值标准也包括在内。最后，多数情况下，还必须包括高纯度参考标准。对氨基苯甲酸（PABA）历来用于防晒防晒剂配方中的抗紫外线成分。由于 PABA 的使用可增加致皮肤癌的风险，目前常用以辛基二甲基对氨基苯甲酸（OD-PABA）形式的衍生物。不过，OD-PABA 的降解可能形成 PABA，因此监测 PABA 在 OD-PABA中的潜在存在非常重要。作为商业产品，考虑到安全性和经济性，OD-PABA 的纯度对于制造商来说十分重要。在本项工作中，我们研究 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统（1200 bar 压力限值的 UHPLC 系统）紫外/可见二极管阵列检测器用于检测OD-PABA 样品杂质的能力。

实验样品制备OD-PABA 的异丙醇溶液的初始浓度为 1mg/mL，随后根据需要稀释到较低浓度。LC/DAD 系统的进样量为 0.2-2 µL。

LC 方法详细内容液相色谱条件Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统二元泵 G4220A,Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统自动进样器 G4226A配切换阀的安捷伦柱温箱 G1316C配有 10 mm 通径光纤流通池的 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统二极管阵列紫外/可见检测器 G4212A色谱柱: （具体使用见各自的色谱图）Agilent ZORBAX SB-C18 RRHT, 3 mm × 50 mm, 1.8 µm600 bar 部件号 827975-302Agilent ZORBAX SB-C18 RRHD, 2.1 mm × 100 mm, 1.8 µm1200 bar, 部件号 858700-902Agilent ZORBAX SB-C18 RRHD, 2.1 mm × 150 mm, 1.8 µm1200 bar, 部件号 859700-902柱温: 40 °C流动相: A = HPLC 级水B =乙腈（ACN）或甲醇（MEOH）（具体流动相见各自的色谱图）流速： 具体流速见各自的色谱图梯度： 梯度条件为 40 %至 90%的乙腈或 50%至 100%的甲醇。梯度斜率一直维持在每柱容增加 3.5%的有机相，相应地改变梯度时间和流速。这是使用安捷伦方法转化器计算而确定的[1]。UV 条件监测 210，254，280 和 320 nm，带宽 4 nm，参考波长关闭

结果和讨论OD-PABA 的 UV 响应，监测到 4 个波长，保留时间为 2 min。分离过程的多波长监测提供了一种简单的方法来捕获多种杂质，并协助最终波长条件的选择以达到所有分析物检测灵敏度大化。